利用代謝工程構(gòu)建高產(chǎn)乙偶姻枯草芽孢桿菌

摘要： 乙偶姻是枯草芽孢桿菌的主要胞外產(chǎn)物,在代謝工程育種中,阻斷目標(biāo)產(chǎn)物的降解途徑或加強(qiáng)目標(biāo)產(chǎn)物前體物的代謝通量是有效提高目的產(chǎn)物積累量的重要手段。該研究克隆了來自枯草芽孢桿菌JNA 3-10的α-乙酰乳酸合成酶(ALS)和α-乙酰乳酸脫羧酶(ALDC)基因als S和als D。在大腸桿菌BL21中分別對(duì)ALS和ALDC進(jìn)行表達(dá)、純化和初步的酶學(xué)性質(zhì)研究,隨后將ALS、ALDC、ALS+ALDC分別在乙偶姻還原酶敲除菌株(BM)中進(jìn)行過量表達(dá),發(fā)現(xiàn)3株重組菌株的乙偶姻產(chǎn)量與BM菌株相比分別提高了5.2%、4.1%和10.8%,最終乙偶姻產(chǎn)量達(dá)到53.5 g/L,生產(chǎn)效率為0.50 g/(L·h)。 （共8頁(yè)）