基于CRISPR/Cas9技術構建與鑒定敲除ACE2基因的Huh7肝癌細胞株

摘要： 利用CRISPR-Cas9基因編輯技術敲除人Huh7肝癌細胞的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)基因，構建ACE2基因敲除細胞株，為研究ACE2在肝細胞癌的作用提供細胞模型。首先，對ACE2結構域進行鑒定，利用在線網(wǎng)站設計兩條破壞所有結構域、靶向作用于ACE2外顯子的sgRNA。其次，構建重組載體并轉(zhuǎn)染肝癌細胞Huh7，嘌呤霉素篩選出單克隆細胞株。最后，免疫印跡鑒定敲除效果。結構域... （共8頁）