梨黑斑病抗病相關(guān)基因PpEMS1的克隆與分析

摘要： 克隆梨抗病相關(guān)基因,并對(duì)其在梨黑斑病抗病防御中的作用進(jìn)行初步分析。基于同源基因克隆方法從"黃冠梨"中克隆獲得一個(gè)預(yù)測(cè)為受體樣蛋白激"酶EMS1的基因,暫命名為PpEMS1。利用生物信息學(xué)、Southern Blot、亞細(xì)胞定位和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)該基因進(jìn)行分析。結(jié)果表明,該基因CDS全長(zhǎng)3 894 bp,編碼1 296個(gè)氨基酸,開(kāi)放閱讀框3 891 bp。Southern Blot分析表明,在"黃冠梨"、"黃花梨"、"翠玉梨"中,該基因都以單拷貝形式存在,在"愛(ài)宕梨"中以多拷貝形式存在。亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示,融合蛋白在細(xì)胞膜和細(xì)胞核均有表達(dá)。熒光定量PCR分析表明,接種黑斑病菌1、2、3、4、5、6、7和8 d后,在"黃花梨"和"愛(ài)宕梨"中該基因表達(dá)均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。推測(cè)該基因可能與梨黑斑病抗性相關(guān)。 （共6頁(yè)）