忽地笑α-葡萄糖苷酶編碼基因的分子克隆與原核表達

摘要： 利用RACE技術從忽地笑(Lycoris aurea (L'Hér.) Herb.)花瓣中克隆獲得一個α-葡萄糖苷酶編碼基因Lau Agl。該基因cDNA全長2 810 bp,開放閱讀框為2 613 bp,編碼含有870個氨基酸殘基的LauAgl蛋白質(zhì)。LauAgl蛋白質(zhì)氨基酸序列具有α-葡萄糖苷酶特征性的保守結(jié)構(gòu)域和天冬氨酸殘基組成的活性中心,其N端含有一個由21個氨基酸組成的信號肽序列,還具有一些蛋白質(zhì)糖基化的潛在位點(N-X-S/T共有序列)。LauAgl蛋白質(zhì)與石刁柏、椰子、油棕等其他植物的α-葡萄糖苷酶的氨基酸序列一致性達到63%以上。利用pET表達系統(tǒng),通過截掉其N-端信號肽序列,可以實現(xiàn)LauAgl蛋白質(zhì)在大腸桿菌中的誘導表達。本研究為Lau Agl蛋白質(zhì)的功能鑒定及其在忽地笑種子萌發(fā)與生長發(fā)育中的作用研究提供理論基礎。 （共8頁）