加強(qiáng)表達(dá)6-磷酸果糖激酶提高Bacillus subtilis乙偶姻合成效率

摘要： 乙偶姻是枯草芽孢桿菌的主要胞外產(chǎn)物,它是一種廣泛使用的食用香精,同時(shí)也可作為重要的化學(xué)中間體,因此提高枯草芽孢桿菌乙偶姻的產(chǎn)量和生產(chǎn)效率有重要意義。本研究克隆了編碼枯草芽孢桿菌6-磷酸果糖激酶(PFKA)和丙酮酸激酶(PK)的編碼基因pfk A和py K,并分別將其在高產(chǎn)乙偶姻的枯草芽孢桿菌BM(敲除了2,3-丁二醇脫氫酶的編碼基因bdh A)中過(guò)量表達(dá)。結(jié)果表明過(guò)量表達(dá)PFKA或者PK能有效提高糖酵解速率以及發(fā)酵過(guò)程的生物量,并且過(guò)量表達(dá)PFKA與過(guò)量表達(dá)PK相比更有利于乙偶姻的合成。在5 L發(fā)酵罐上對(duì)工程菌進(jìn)行發(fā)酵實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),經(jīng)底物流加發(fā)酵,乙偶姻產(chǎn)量達(dá)到66.8 g/L,生產(chǎn)效率達(dá)到0.74 g·(L·h)-1。本研究為利用枯草芽孢桿菌作為細(xì)胞工廠生產(chǎn)相關(guān)化合物有重要的借鑒意義。 （共7頁(yè)）