粘質(zhì)沙雷氏菌中乙偶姻合成途徑基因克隆、序列分析及表達(dá)

摘要： 運(yùn)用生物信息學(xué)和PCR方法,鑒定了粘質(zhì)沙雷氏菌乙偶姻生物合成途徑中編碼α-乙酰乳酸脫羧酶(α-ALDC)和α-乙酰乳酸合成酶(α-ALS)的基因(aceA和aceB)序列。經(jīng)測序和序列分析顯示aceA和aceB基因的開放閱讀框(ORF)長度為780 bp和1 686 bp,編碼259和561個氨基酸,編碼蛋白分子量和等電點(diǎn)分別為28.96 kD和5.48,60.70 kD和5.88,屬酸性蛋白。將兩基因分別克隆至pET28a(+)表達(dá)載體中,并轉(zhuǎn)化E.coli BL21(DE3)進(jìn)行IPTG誘導(dǎo)表達(dá),SDS-PAGE結(jié)果表明在大約29 kD和60 kD的位置出現(xiàn)特異性蛋白條帶,表明aceA和aceB基因在E.coli BL21(DE3)中獲得了高效的表達(dá)。 （共6頁）