紅螯螯蝦網(wǎng)格蛋白輕鏈的克隆及制備抗體的檢測(cè)
摘要: 網(wǎng)格蛋白為三腳蛋白復(fù)合體,其介導(dǎo)的內(nèi)吞作用是病毒侵染細(xì)胞的常用途徑之一.而對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的主要病原,為了研究分析WSSV的侵染機(jī)制及進(jìn)入宿主細(xì)胞的途徑,在本研究中,克隆得到紅螯螯蝦(Cherax quadricarinatus)網(wǎng)格蛋白輕鏈的c DNA全長(zhǎng),并將其命名為Cq CLC(Genbank登錄號(hào)為KR075008).進(jìn)化樹分析表明,其與黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)的網(wǎng)格蛋白輕鏈進(jìn)化距離較近.此外,在其蛋白序列中選擇抗原性較好的片段合成多肽,并以此制備單克隆抗體,而后經(jīng)免疫熒光和western blot檢測(cè)從中篩選出具有特異性的抗體,為進(jìn)一步對(duì)WSSV侵染蝦細(xì)胞機(jī)制及入胞途徑的研究奠定了基礎(chǔ). (共6頁(yè))
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