柳杉SSR引物的篩選及反應(yīng)體系的優(yōu)化

摘要： 利用正交設(shè)計方法對柳杉SSR反應(yīng)體系中的Mg2+、DNA模板、聚合酶、dNTP、引物等5個反應(yīng)因子進(jìn)行了優(yōu)化,同時對反應(yīng)程序中的退火溫度進(jìn)行篩選。結(jié)果表明:(1)柳杉10μL的SSR反應(yīng)體系的最優(yōu)條件為Mg2+濃度2.0 mmol/L、4種dNTP濃度均為0.15 mmol/L、正反引物均為0.3μmol/L、Taq聚合酶為0.5μmol/min、DNA模板為20 ng;(2)從柳杉屬植物的106對SSR引物中篩選出了多態(tài)性高,穩(wěn)定性好的26對引物;(3)優(yōu)化了篩選出的26對引物的退火溫度。 （共5頁）