赪桐提取物抗菌活性及其對(duì)金黃色葡萄球菌的抗菌機(jī)理

摘要： 【目的】揭示赪桐提取物(Extracts from Clerodendrum japonicum,EFC)對(duì)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抗菌機(jī)理,為臨床抗病原菌感染藥及植物殺菌劑的研發(fā)提供理論依據(jù)?！痉椒ā坎捎眉埰瑪U(kuò)散法和微量肉湯稀釋法測(cè)定金黃色葡萄球菌、傷寒沙門菌和枯草芽孢桿菌對(duì)EFC的敏感性,明確EFC的抗菌活性;通過(guò)試劑盒、流式細(xì)胞儀及掃描電鏡等測(cè)定EFC作用后金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜、細(xì)胞壁、三羧酸(TCA)循環(huán)、可溶性蛋白、胞內(nèi)活性氧(ROS)水平、細(xì)胞凋亡及形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化,研究EFC的抗菌機(jī)理?！窘Y(jié)果】EFC對(duì)金黃色葡萄球菌、傷寒沙門菌和枯草芽孢桿菌3種供試細(xì)菌均具有抗菌活性,其中對(duì)金黃色葡萄球菌的抗菌活性最強(qiáng),其抑菌圈(IZ)、最小抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC)分別為19.04 mm、0.50 mg/mL和1.00 mg/mL。經(jīng)EFC作用10 h后,金黃色葡萄球菌的乳酸脫氫酶(LDH)、鉀離子(K+)及堿性磷酸酶(AKP)外泄分別顯著增加72.0%、43.0%和78.0%(P<0.05,下同),琥珀酸脫氫酶(SDH)和蘋果酸脫氫酶(MDH)活性分別顯著下降80.0%和36.4%。金黃色葡萄球菌經(jīng)EFC作用24 h后,與對(duì)照組相比,5MIC(2.50 mg/mL)、10MIC(5.00 mg/mL)和20MIC(10.00 mg/mL)組的胞外蛋白含量分別上升28.6%、41.8%和61.5%,胞內(nèi)蛋白含量分別下降40.9%、61.3%和82.5%,胞內(nèi)ROS水平分別增加9.1%、33.5%和51.0%,細(xì)胞凋亡率分別增加24.0%、50.6%和72.8%。經(jīng)EFC作用24 h后,掃描電鏡下的菌體形態(tài)結(jié)構(gòu)不規(guī)則、萎縮、畸形?！窘Y(jié)論】EFC通過(guò)破壞金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的完整性及通透性,影響蛋白合成,導(dǎo)致TCA循環(huán)減慢而發(fā)揮抑菌作用。 ... （共9頁(yè)）