PCR和HRM兩種方法檢測細菌耐藥基因aac(6′)-Ib-cr的比較研究

摘要： 目的研究聚合酶鏈反應(PCR)和高分辨熔解技術(shù)(HRM)兩種方法檢測細菌耐藥基因氨基糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶的變異基因(aac(6′)-Ib-cr)檢出率的差異性。方法采用PCR方法檢測299株臨床常見的革蘭陰性桿菌的aac(6′)-Ib基因,并以內(nèi)切酶BtsCI酶切消化aac(6′)-Ib的PCR陽性產(chǎn)物以確定aac(6′)-Ib-cr;同時采用HRM技術(shù)檢測以上所有菌株的aac(6′)-Ib和aac(6′)-Ib-cr基因。結(jié)果PCR和酶切法共檢出aac(6′)-Ib基因29株,其中有21株變異為aac(6′)-Ib-cr,變異率為72.4%(21/29)。而且HRM技術(shù)檢測的結(jié)果與其完全一致。結(jié)論PCR和HRM兩種方法檢測細菌耐藥基因aac(6′)-Ib-cr的能力相當,可以用更簡便的HRM技術(shù)替代PCR和酶切法檢測aac(6′)-Ib-cr基因,尤其適用于大量篩檢。 ... （共3頁）