基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)構(gòu)建Lep基因敲除小鼠模型

摘要： 目的 本研究旨在利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)構(gòu)建Lep基因敲除小鼠(C57BL/6N-Lep~(em1)/Nifdc,簡稱ob小鼠),作為肥胖癥、糖尿病等臨床疾病體內(nèi)藥物評價的動物模型。方法 根據(jù)CRISPR/Cas9靶點設(shè)計原則，設(shè)計能夠靶向小鼠Lep基因的sgRNA,經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄，與Cas9 mRNA一并注射入小鼠受精卵。隨后提取出生小鼠的鼠尾DNA,采用PCR檢測及測序技... ... （共7頁）