CRISPR/Cas9技術(shù)敲除斑馬魚(yú)cdc42基因?qū)擒浌前l(fā)育的影響
摘要: 目的 利用CRISPR/Cas9技術(shù)敲除斑馬魚(yú)cdc42基因,探討其對(duì)早期骨軟骨發(fā)育的影響。方法 通過(guò)多序列比對(duì)分析cdc42的種屬保守性,設(shè)計(jì)cdc42基因的gRNA,利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建cdc42敲除的斑馬魚(yú)突變體。應(yīng)用整胚原位雜交檢測(cè)cdc42的表達(dá)模式,繁殖并利用轉(zhuǎn)基因標(biāo)記魚(yú)系Tg(col2a1a:GFP)觀察軟骨發(fā)育表型,并通過(guò)茜素紅染色觀察椎體礦化。結(jié)... ...
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