重組E.coli宿主中質(zhì)粒DNA拷貝數(shù)qPCR檢測(cè)方法的建立及驗(yàn)證
摘要: 目的 建立重組E.coli宿主中質(zhì)粒DNA(pDNA)拷貝數(shù)的qPCR檢測(cè)方法,并進(jìn)行驗(yàn)證,以期為mRNA疫苗研發(fā)提供可靠的檢測(cè)方法。方法 根據(jù)E.coli Top10基因組DNA序列設(shè)計(jì)用于qPCR擴(kuò)增的引物及探針,并優(yōu)化引物濃度。提取重組E.coli/pUC57-HA的全DNA(宿主DNA+pDNA),以其為模板,建立pDNA拷貝數(shù)的qPCR檢測(cè)方法,并驗(yàn)證方法的線性范圍、... ...
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