基于酵母雙雜交技術(shù)對(duì)與納爾遜海灣正呼腸孤病毒σNS相互作用宿主蛋白的篩選
摘要: 目的:探討小鼠成纖維L929細(xì)胞中與納爾遜海灣正呼腸孤病毒(NBV)σNS蛋白相互作用(互作)的宿主蛋白,闡明宿主蛋白對(duì)病毒復(fù)制的影響。方法:構(gòu)建表達(dá)σNS蛋白的誘餌質(zhì)粒pGBKT7-S3,采用測(cè)序技術(shù)驗(yàn)證誘餌質(zhì)粒在Y2H酵母細(xì)胞中的準(zhǔn)確表達(dá)。將pGBKT7-S3和pGADT7質(zhì)粒分別和共同轉(zhuǎn)化至Y2HGold酵母細(xì)胞中,涂布于固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),觀察菌落生長(zhǎng)情況,確認(rèn)σNS蛋... ...
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