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聯(lián)合酶解法結(jié)合UPLC Q-TOF高分辨質(zhì)譜檢測(cè)重組水蛭素蛋白的二硫鍵結(jié)構(gòu)

中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志 頁(yè)數(shù)： 10 2023-11-10
摘要： 采用聯(lián)合酶切法結(jié)合UPLC Q-TOF高分辨質(zhì)譜解析重組水蛭素蛋白的復(fù)雜二硫鍵交聯(lián)結(jié)構(gòu)。首先從蛋白水平驗(yàn)證重組水蛭素蛋白是否含有游離半胱氨酸，包括高分辨質(zhì)譜表征相對(duì)分子質(zhì)量和定量檢測(cè)游離巰基；然后利用單一酶解法標(biāo)注每個(gè)或每組二硫鍵在蛋白序列中所處的位置；最后根據(jù)單酶所測(cè)結(jié)果，設(shè)計(jì)混合酶切的方式確定具體的二硫鍵配對(duì)方式，并利用二硫蘇糖醇還原法加以驗(yàn)證，最終確證重組水蛭素蛋白的二硫... ... （共10頁(yè)）

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