成簇pri-miRNAs表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)驗(yàn)證
摘要: 目的:旨在建立一個(gè)多重表達(dá)任意miRNA的方案,實(shí)現(xiàn)多個(gè)pri-miRNA表達(dá)閱讀框的串聯(lián),用于miRNA簇或者miRNA家族的功能研究。方法:通過(guò)改造CRISPR/Cas9系統(tǒng)共表達(dá)載體42230,插入EGFP編碼序列以及單個(gè)pri-miRNA序列,實(shí)現(xiàn)單個(gè)pri-miRNA表達(dá)載體可視化的構(gòu)建。在單個(gè)pri-miRNA表達(dá)載體的基礎(chǔ)上,通過(guò)同源重組的方式,插入下一個(gè)pri-... ...
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