利用無縫克隆方法構(gòu)建埃及伊蚊表皮蛋白基因AaCPR100A雙向啟動子蘇云金芽孢桿菌穿梭載體
摘要: 目的 構(gòu)建表達dsRNA的雙向啟動子以及靶基因AaCPR100A的大腸桿菌-蘇云金芽孢桿菌穿梭載體pHT315-AaCPR100A。方法 以蘇云金芽孢桿菌pSVP27A質(zhì)粒為模板通過PCR擴增蘇云金芽孢桿菌Cry3A正向啟動子Pro-1(+);以埃及伊蚊RNA反轉(zhuǎn)為cDNA為模板,擴增靶基因AaCPR100A;將大腸-蘇云金穿梭載體pHT315質(zhì)粒經(jīng)HindⅢ和SalⅠ雙酶切線... ...
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