重組人甲硫氨酸硫氧化物還原酶的原核表達(dá)、純化及鑒定
摘要: 目的 :表達(dá)、純化并鑒定人甲硫氨酸硫氧化物還原酶 (hMsrA)?!》椒?:將含有hMsrA基因的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌 ,經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá) ,表達(dá)蛋白主要存在于上清中 ,經(jīng)破菌、Ni NTAAgarose親和層析分離純化目的蛋白?!〗Y(jié)果 :SDS PAGE顯示純化的蛋白相對(duì)分子質(zhì)量為 2 6 0 0 0的單一條帶 ;Western blot鑒定該純蛋白有免疫活性 ;酶活性測(cè)定表明 ,該純化蛋白具有還原甲硫氨酸硫氧化物的能力?!〗Y(jié)論 :hMsrA能在原核體系中良好表達(dá) ,經(jīng)純化后具有催化活性 ,為大量制備并進(jìn)一步研究抗氧化劑在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用提供了科學(xué)途徑。 ...
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